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新聞  丨 2025.06.20

用于高分辨率生物打印的新型(PNIPAAm)基雙凝膠墨水

本文介紹了一種用于高分辨率生物打印的新型聚 N – 異丙基丙烯酰胺(PNIPAAm)基雙凝膠墨水和熱可逆泊洛沙姆支撐浴系統。該墨水通過快速熱凝膠化和自發共價交聯反應,結合支撐浴在水合加熱環境中維持結構,可產生直徑 80-200μm 的均勻纖維多層結構。研究通過流變學分析、打印實驗和細胞兼容性測試,闡明了打印因素間的關系,證明了該系統在無細胞和細胞負載支架高分辨率打印中的能力,為擠壓基生物墨水與支撐浴的打印研究提供了新方向。

一、研究背景與目的

  1. 擠壓生物打印的挑戰:傳統擠壓打印因墨水高粘度(10s-1000s Pa?s)限制噴嘴尺寸,難以實現百微米以下分辨率。
  2. 創新解決方案:開發 PNIPAAm 基雙凝膠墨水與泊洛沙姆支撐浴系統,利用熱凝膠化和共價交聯,結合支撐浴維持結構,提升打印分辨率。

二、材料設計與制備

  1. 熱凝膠大分子(TGM)合成
  1. 組成:NIPAAm(86.5 mol%)、GMA(7.5 mol%)、DBA(3.5 mol%)、AA(2.5 mol%),AIBN 引發劑。
  2. 特性:LCST onset 19.9±0.7℃,peak 25.5±1.0℃,分子量 Mn=19849 Da,PDI=2.76。
    1. 交聯劑(PAMAM)合成:MBA 與哌嗪(3:4 molar ratio)反應,Mn=1776 Da。
    2. 墨水與支撐浴制備
  3. 墨水:TGM 與 PAMAM 按 4:3 質量比混合,濃度 17.5%-35% w/v。
  4. 浴:泊洛沙姆 F-108 溶于水,濃度 25%-35% w/v。

三、關鍵實驗方法


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四、主要結果

指標 結果
纖維直徑 80-200 μm(27G-32G 噴嘴),隨墨水濃度增加而增大
孔隙 Pr score 27G 組 > 1.0,32G 組 35% 墨水組顯著升高
形狀均勻性 27G 組 > 0.8,32G 組 35% 墨水組降低
面積均勻性 27G 組 > 0.9,32G 組 17.5% 墨水低濃度浴降低
彈性模量 17.5% 墨水:9.5±3.4 kPa;35% 墨水:12.0±4.8 kPa

五、結論與意義

  1. 技術突破:實現 10s 微米級分辨率,大支架(5 mm 高)打印成功。
  2. 材料優勢:雙凝膠機制結合泊洛沙姆浴,兼顧結構穩定性與細胞兼容性。
  3. 應用前景:為骨軟骨組織工程提供高分辨率支架,推動熱凝膠材料在生物打印中的應用。

關鍵問題

1. 該研究中雙凝膠墨水的交聯機制是什么?

答案:雙凝膠墨水基于 PNIPAAm 的熱凝膠化和 PAMAM 交聯劑的共價交聯。PNIPAAm 在高于 LCST(25.5℃)時快速熱凝膠化,形成物理網絡;同時,PAMAM 與 TGM 中的 GMA 環氧基團發生胺 – 環氧反應,形成共價交聯網絡,增強機械性能并防止脫水收縮。

2. 泊洛沙姆支撐浴在打印中的關鍵作用是什么?

答案:泊洛沙姆支撐浴在 37℃形成凝膠,為低粘度墨水提供機械支撐,維持擠出纖維的形狀 fidelity。浴具高儲能模量(7.5-17 kPa)和 yield stress(57.4-174.6 Pa),可自愈合并傳導熱量,確保墨水快速熱凝膠化,同時維持水合環境適合細胞培養。

3. 該系統實現的打印分辨率如何,細胞兼容性表現怎樣?

答案:打印分辨率可達纖維直徑 80-200 μm,孔隙形狀均勻性 > 0.8。細胞兼容性方面,leachables 無毒性,打印后 3 h 和 24 h 細胞 viability 約 43%,表明系統可用于細胞負載支架打印,雖 viability 有待提升,但證明了可行性。

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